程颖：周而复始细胞在小细胞肺癌临床研究中的进展

循环细胞内( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检骨骸”，已在分散性乳癌、癌和结直肠癌里面用于肾功能评论。小细胞内前列腺癌(Small celllung cancer，SCLC)该组织骨骸是从不足，且缺乏有效的天气预报患分散和预见肾功能的生物圣万。据统计年来深入科学界CTCs在SCLC里面的流行病学领域来进行了与此相反深入研究，注意到CTCs对SCLC的诊断、再行，天气预报患、分散，统计分析报告、肾功能以及创设个体肌肉注射程方案等有着最主要意涵，本文就CTCs在SCLC流行病学领域里面的深入研究困难重重予以综述。

一、SCLC症状CTCs的检验步骤则

CTCs的检验步骤则主要有流式细胞内检验技术( fluocytometry，FCM)、核苷一聚合酶链加成(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统设计、CTC芯片(CTC-chip)技术和膜滤过分离出来细胞内技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其里面CellSearch系统设计因其半自动化的配置游戏平台，很高的酪氨酸、诱发和可重复性，已是最常领域的CTCs检验步骤则。

早在2004年，Allard等率先领域CelISearch法则检验了99事例前列腺癌（未列出SCLC事例数）症状的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip法则检验了55事例前列腺癌症状外周噬C TCs。2009年以后的深入研究多采用CeIISearch法则检验SCI．C症状外周噬CTCs，然而该步骤则由于对缺乏上皮细胞内功能性的细胞内会经常出现漏检确实，且与免疫磁珠及抗体联结的CTCs没有则行某些原先的检验，流行病学领域受到上都。

据统计年来，随着基体科技的演进，抗病毒CTCs外层圣万的酪氨酸识别分f修饰的基体材料联结微流控技术的CTCs检验游戏平台的深入研究受到尤其关注，2013年，《自然》（Nature）杂志将CTCs基体检验选为最具创新性和转化潜力的诊断新步骤则，研究成果令人瞩目。但就迄今来看，原先的CTCs检验步骤则各有利弊，未有深入研究声称哪种步骤则对SCLC的CTCs检验越来越有优势。着眼越来越进一步，亟需技术开发酪氨酸、诱发很低的CTCs检验技术，为SCLC的基础和流行病学深入研究带给突破。

二、CTCs在SCLC流行病学领域里面的深入研究现状

（一）CTCs枚举与SCLC的诊断、再行

据统计年来多项深入研究显示CTCs枚举水准与SCLC的诊断、再行有密切关系0 2009年Tanaka等领域CeIISearch法则检验了1 50事例7.5ml外周噬CTCs，其里面前列腺癌1 25事例、非恶性25事例，前列腺癌症状有数116事例非小细胞内前列腺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9事例SCLC。

深入研究%-SCLC症状CTCs阳性率为66.70-/0（6事例／9事例），明显高于NSCLC症状的CTCs阳性率(胰脏25.9%，鳞癌40.9%；胰脏对比SCLC，P

同年，Hou等领域CeIISearch法则检验了50事例初治的SCLC症状外周噬CTCs，有数20事例上都期SCLC (limited disease，LD-SCLC)症状和30事例尤其期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)症状，终端期ED-SCLC及LD-SCLC症状的里面位CTCs枚举分别为237和2个/7.5ml噬，7事例未检出CTCs的症状均为LD-SCLC，显然CTCs枚举水准与SCLC再行具体。

类似的假设在2012年被日本学者Naito等声称，深入科学界在51事例SCLC症状里面立用CeIISearch法则检验终端期CTCs水准，%-ED-SCLC,症状的里面位CTCs枚举为9.5个f 7.5ml噬，而LD-SCLC仅为1个／7.51111噬，进一步显然ED-SCLC症状的CTCs水准高于LD-SCLC症状。

（二）CTCs统计分析报告SCLC的及肾功能

CTCs是不是可作为统计分析报告SCLC和肾功能的有救指f,楔深入科学界们一直在探讨的弊端。Houi等在2009年通过CellSearch法则检验了50事例SCLC症状(LD-SCLC20事例，ED-SCLC30事例)的CTCs，注意到CTCs>300个/7.5ml噬的症状及CTCs

终端期CTCs>=50和

在该深入研究里面SCLC症状的肾功能并不一定值来让8个/7.5ml噬，便是将症状分别为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样领域CellSearch法则检验59事例SCLC症状在终端期、1长周期肌肉注射后及4长周期肌肉注射结束后外固噬CTCs水准，其里面ED-SCLC症状38事例，LD-SCLC症状2 1事例c终端期有43事例症状(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml噬，CTCs>215个/7.5ml噬和CTCs

经过1长周期肌肉注射后症状CTCs水准有所增加，且1长周期肌肉注射后CTCs

深入科学界推断CTCs水准是SCLC肾功能的独立负面影响因子，其里面1长周期肌肉注射后CTCs水准是SCLC和肾功能最强的预见因子。

2013年ASCO刊发的ECOG1508深入研究里面，深入科学界为了让在155事例ED-SCLC里面加入抗病毒疗程，并对其里面123事例症状终端期CTCs来进行检验，%-抗病毒疗程未能延长ED-SCLC症状的PFS和OS，但注意到终端期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml噬的mPFS分别为4.4和4.3个年末（P=0.07），OS分别为10.7和7.2个年末(P=0.01)。深入科学界认为虽然抗病毒疗程没能提高ED-SCLC症状的PFS和OS，但却注意到了CTCs确实是SCLC症状的肾功能圣万。

最据统计，Igawa等为了让领域OBP-401试验里面检验SCLC症状外周噬CTCso领域OBP-401试验里面检验乳癌和胃癌症状CTCs的具体深入研究已有前期报道。深入研究纳入30事例韧治的SCLC症状，29事例症状(96%)外周噬CTCs阳性。在终端期，21事例症状CTCs

（三）CTCs天气预报SCLC的患和分散

原先的深入研究表明通过检验CTCs的经常出现来天气预报SCLC的患和分散有着最主要的流行病学意涵o Tanaka等深入研究注意到CTCs水准‘j 125事例前列腺癌症状（有数9事例SCLC症状）困难重重明显具体，特别是与周围分散密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，著者认为CTCs可作为天气预报前列腺癌周围分散的生物标记物。Natio等深入研究注意到SCLC在终端期、疗程结束后及患后CTCs的阳性率分别为68.6%、26.5%和67.6，指引SCLC患后外周学CTCs水准升高，发生周围分散脏器的个数为0、1和>=2的症状其里面位CTCs枚举分别为2.0、7.5和21个/7.5ml噬,指引CTCs水准与周围分散脏器的个数有关，周围分散越多，CTCs枚举越高（p

三、CTCs在SCLC流行病学领域里面的探索方向

患和分散是导致症状疗程失败和死亡的主要状况，设法注意到的患和分散并采敢积极有效的疗程措施可明显提高症状准确率。然而，由于SCLC缺乏必需天气预报患和分散的生物圣万，且同样影像学检验没有则注意到微分散灶及微小残留病灶，导致发生患和分散的SCLC症状没法设法放弃诊断和疗程。

流行病学里面部分LD-SCLC的症状肾功能类似之处较大，指引有些上都期的症状在诊断时确实已发生了影像学没法注意到的微分散而已是潜在的尤其期症状。通过检验外周噬CTCs的经常出现及个数巨大变化从而对SCLC症状体内平衡状态来进行数据处理、高效率地天气预报和评论，设法注意到的患、分散，将有助于流行病学医生对疗程意图的把握和疗程策略的选项，但是不是CTCs的个数或巨大变化值为多少时必需精确再现SCLC的患或分散亦然不明确，只能越来越多的循证医学证据予以支持。

CTCs在统计分析报告SCLC症状疗程方面的领域亦然处于探索期里面，疗程过程里面CTCs个数的巨大变化与SCLC症状肌肉注射的具体性及其与SCLC症状放疗意图的选项等弊端在越来越进一步需大量的流行病学深入研究。据统计5年，对CTCs是不是可作为SCLC症状肾功能衡量的深入研究逐渐增加，但SCLC最佳的肾功能CTCs并不一定值亦然无定论，争论颇多。

其里面3项来自Hou、Naito、Hiltermann的深入研究将SCLC的肾功能CTCs何在定值分别来让为50、8和2个／7.5ml噬，类似之处很大，这确实与深入研究采用的统计学步骤则不尽相同以及入组样本量较少有关。据统计期意大利学者Normanno等观点将ED-SCLC和LD-SCLC症状分开深入研究，对终端期、l长周期肌肉注射后CTCs以及疗程前后CTCs的巨大变化值分别来让肾功能并不一定值，为越来越进一步的深入研究获取了新的出发点。笔者所在的科学研究团队也正致力于要务SCLC症状肾功能最佳CTCs并不一定值的深入研究，结果令人期待。

的个体肌肉注射程是疗程模式的演进方向。SCLC症状对肌肉注射药物的加成存在明显的个体类似之处，其主要状况确实与复杂的异质性、突变表达类似之处及多态性有关。所以，逐步明晰SCLC的突变组学功能性对做到真正意涵上的SCLC个体肌肉注射程尤为最主要。据统计期要务学者王洁等深入研究部门通过领域单细胞内突巨大变化学合成手段对症状单个CTC来进行全突变组、外显子突变组化学合成。

在此项深入研究里面，谢晓亮教授发明的多重退火和环化循环的扩增技术(MAIBAC)，最终做到了对症状外周噬单个CTC的全突变组扩增和剖面化学合成，在单个细胞内水准探测全突变组突变拷贝数变异(CNVs)和单核苷酸变异(SNVs)o单细胞内水准CTCs突变组化学合成技术可设法获取如耐药突变突变等个体肌肉注射程所需的最主要信息，同时也为越来越进一步SCLC抗病毒药物的技术开发获取技术支持。

SCLC该组织骨骸难以获取，受限了原先各项检验和深入研究的推展，而利用CTCs构建的SCLC循环细胞内GameCube瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，年末解决这一棘手难题。最据统计，Hodgkinson等为了让将6事例ED-SCLC症状lOml外周噬里面的CTCs萃取后注射到致病动物模型皮下，结果在4只动物模型身上呈现出了CDXs，显然SCLC症状的CTCs有着致瘤性。

同时领域CelISearch法则检验这6事例SCLC症状的CTCs，%-最终呈现出CDXs的4事例症状的CTCs枚举均>400个／7.5ml噬，而另外2事例未呈现出CDXs的症状其CTCs枚举分别为222和20个／7.5ml噬，指引SCLC的CTCs致瘤性与外周噬CTCs教量有关。进一步统计分析注意到相较于肌肉注射诱发SCLC，肌肉注射HIVSCLC症状的CDXs减半时间短、植被越来越短时间。对3事例CDXs给予顺铂和融为一体泊苷肌肉注射药物，其诱发顺序为CDX3>CDX2>CDX4，也就是说症状的OS分别为9.7.3.5.0.9个年末，指引对CDXs来进行体内药敏试验里面可以间接加成症状生存时间。

该深入研究显示部分SCLC的外周噬CTCs有着生殖细胞内功能性，可来进行体内指导、呈现出与原发高度类似的CDXs，为SCLC症状的体内药敏试验里面、耐药组态统计分析等一系列检验和深入研究获取了补充的该组织，解决了SCLC症状骨骸是从不足的弊端。

假设

从现行的深入研究可以看出，虽然CTCs在SCLC里面的流行病学领域仍处于探索期里面，但前景广阔。迄今，诸多转化性深入研究正在来进行里面，相信随着深入研究的不断深入，CTCs年末已是SCLC的突破口，期待CTCs在SCLC的领域里面为我们带给惊艳。

校对： 寒